Pantothenic acid(판토텐산)(Vitamin B5(비타민B5)) HPLC-UV/PDA/FL

제8. 2.2.2.10 판토텐산 가. 고속액체크로마토그래프에 의한 정량 / 나. 고속액체크로마토그래프/질량분석기에 의한 정량

컬럼: [가. LC-UV] 역상 분배형(C18 또는 이와 동등한 것, 1.5 mm × 250 mm, 5 μm) / [나. LC-MS] UPLC HSS T3(2.1 mm × 100 mm, 1.8 μm) 또는 이와 동등한 것
이동상: [가. LC-UV] A: 20 mM potassium phosphate(pH 2.1), B: 20 mM potassium phosphate/ACN(80/20). A:B(96:4) 혼합액으로 37분간 흘려보낸 후 B 용액으로 10분간 세척 (원문 표기 "20mN potassium phosphate/ACN(80/20)"의 mN은 mM의 오기로 보임) / [나. LC-MS] A: 10 mM 개미산암모늄, B: 아세토니트릴. 그라디언트(시간(분), A%, B%) — 0.0(95/5) → 1.0(65/35) → 2.0(45/55) → 2.1(5/95) → 3.0(5/95) → 3.1(95/5) → 5.0(95/5)
유속: [가. LC-UV] 120 μL/min / [나. LC-MS] 0.3 mL/min
검출: [가. LC-UV] 자외부(UV) 검출기 200 nm / [나. LC-MS] 질량분석기(MRM)
주입량: [가. LC-UV] 10 μL / [나. LC-MS] 1 µL
컬럼온도: [가. LC-UV] 원문 미명시 / [나. LC-MS] 40℃

가.(LC-UV)를 주 기법으로 삼음 — 적용범위 조항이 없어 식품 일반에 적용되는 반면, 나.(LC-MS)는 "조제식류 및 조제유류 등에 적용한다"로 한정된다. 두 방법의 조건을 모두 병기했다. 가. 장치는 "액체크로마토그래프 : 자외부검출기를 사용한다", 나. 장치는 "액체크로마토그래프 : 질량분석기". 나.의 질량분석기 조건: 이온화 ESI positive, 판토텐산 Precursor ion 220 → Fragment ion 90, 184, 202(m/z). 가. 전처리: 검체 적당량을 분쇄 후 20 mM 인산완충용액으로 30분 초음파 추출하여 50 mL로 맞추고 3,000 rpm 원심분리한 상등액을 0.45 μm 막 여과지로 여과. 나. 전처리: 균질화 검체 0.5～1.5 g에 1% 초산 함유 5% 아세토니트릴 30 mL를 가해 65℃ 항온수조에서 10분 반응, 냉각 후 같은 용매로 50 mL 정용하고 3,500×g에서 15분 원심분리한 상등액을 증류수로 희석해 0.45 μm 여과. 표준품은 D-pantothenic acid hemicalcium salt를 사용하며 계산 시 판토텐산 분자량 219.23 / 판토텐산 칼슘 분자량 238.27 비율을 곱한다. 두 법 모두 정량한계 원문 미명시.

출처: 식품공전 · 식약처 고시 제2026-1호 (시행 2026.1.13. 반영) · 원문 보기

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