Amino acid(아미노산) HPLC-UV/PDA/FL

원문에 HPLC 기기조건 표(칼럼·이동상·유속·검출기·주입량)가 전혀 제시되어 있지 않다. 분석장비로 단백질 가수분해장치, 아미노산 자동분석기(2.2.2), 고속액체크로마토그래프(2.2.3)만 열거되고, 5.2 "고속액체크로마토그래프에 의한 정성 및 정량"에서 "각각의 고속액체크로마토그래프에서 주어진 조건에 맞추어 유도체를 만든 후" 표준용액과 동일 조건으로 검량곡선을 작성하라고만 규정한다(유도체화 후 분석, 조건은 기기별 위임). 표준물질도 D-Cystine(분자량 240.30, CAS No. 349-46-2)과 D-Tryptophane(분자량 204.23, CAS No. 153-94-6) 2종만 별도 규정되어 있고 대상 아미노산 목록은 원문 미명시. 전처리(단백질구성 아미노산): 동결건조·분말화(고지방 시료는 에테르 탈지) → ① 시스틴·트립토판 이외: 단백질 약 10 mg에 0.05%(w/v) 2-머캅토에탄올 함유 6 N 염산 10 mL, 탈기·봉관 후 110±1℃에서 22~24시간 가수분해 → 40℃ 감압 농축건조로 염산 제거 → 0.2 N 구연산나트륨 완충액(pH 2.2) 또는 0.02 N 염산용액으로 정용. ② 시스틴: 0℃ 과개미산용액(과산화수소:개미산 = 1:9) 10 mL로 4시간(불용성은 하룻밤) 산화 후 동결건조, 6 N 염산으로 110±1℃ 18시간 분해. ③ 트립토판: 가용성전분 100 mg + 4.2 N 수산화나트륨용액 3 mL, 135±1℃ 22시간 가수분해 후 6 N 염산 중화, 0.2 N 구연산나트륨완충액(pH 4.25)으로 정용. 유리 아미노산: 물 추출법(고체·페이스트) 또는 16% 트리클로로초산법(액체). 정량한계는 원문 미명시.