공전·공정시험법 DB › 건강기능식품공전
비타민 A(제2법) HPLC-UV/PDA/FL
건강기능식품의 기준 및 규격 제4. 3-1 비타민 A / 3-1-2 비타민 A(제2법)
- 컬럼
- 옥타데실실릴화한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충전제 octadecyl silica) 또는 이와 동등한 것
- 이동상
- 에탄올 : 물 (95 : 5) — 등용매
- 유속
- 0.5 mL/분
- 검출
- 형광검출기(FLD) 여기파장 340 nm, 측정파장 460 nm
- 주입량
- 20 μL
- 컬럼온도
- 35℃
제1법은 삼염화안티몬 정색용액을 이용한 분광광도법(620 nm)으로 크로마토그래피가 아니며, 본 제2법이 HPLC 정량법이다. 표준물질: Retinyl Acetate(Retinol acetate; Vitamin A acetate, C22H32O2, 분자량 328.49, CAS 127-47-9). 전처리: 비타민 A 약 20~30 IU(6~9 μg) 상당 시료에 에탄올 30 mL·피로갈롤에탄올용액(1→10) 1 mL·90% 수산화칼륨 3 mL를 넣고 95℃ 수욕에서 30분 비누화 → 석유에테르 추출·수세·무수황산나트륨 탈수 → 40~50℃ 감압농축 → 이소프로판올 1.0 mL 재용해. 계산: 함량(IU/g) = A × (B × C) / D (1 μg = 3.333 IU). 정량한계는 원문 미명시.
출처: 건강기능식품공전 · 식약처고시 제2026-43호 (시행 2026.6.11. 시행) · 원문 보기
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