공전·공정시험법 DB › 사료공정(사료표준분석방법)
Aflatoxin(아플라톡신)(B1, B2, G1, G2) HPLC-UV/PDA/FL
사료표준분석방법 7.1. 아플라톡신 (Aflatoxin B1, B2, G1, G2)
- 컬럼
- 가. HPLC법(실리카겔 칼럼 정제): Reverse phase C18 Column (4.6 mm × 25 cm) / 라. HPLC법(Immunoaffinity column 정제): C18 (4.6 × 150 mm, 3.5 μm 또는 4.6 × 200 mm, 5 μm)
- 이동상
- Isocratic. 가. HPLC법: H2O + Methanol + CH3CN (66+19+25) / 라. IAC 정제법: methanol : water (50:50, v/v) with KBr 0.119 mg/L, 4 M nitric acid 350 μL — 또는 water : acetonitrile : methanol (60:15:25, v/v/v)
- 유속
- 가. HPLC법: 0.96 mL/min 또는 2 mL/min / 라. IAC 정제법: 1 mL/min
- 검출
- 형광검출기(Fluorescence Detector), Ex 338 nm / Em 425 nm (양 방법 동일)
- 주입량
- 라. IAC 정제법: 10 μL / 가. HPLC법: 원문 미명시
- 컬럼온도
- 원문 미명시
- 대상 화합물
- 4종 동시분석
대상 4성분(B1, B2, G1, G2). 가. HPLC법은 시료 50 g을 메탄올 150 mL + 증류수 100 mL + n-헥산 100 mL로 30분 진탕 추출 → 세라이트 545 여과 → 클로로포름 분배 → 실리카겔 칼럼(22×300 mm) 정제 → 클로로포름+메탄올(97+3) 200 mL 용출 → 3불화초산(TFA) 100 μL로 유도체화(B1·G1 형광 증강) → 메탄올:물 동량으로 용해 후 0.45 μm 여과. 라. HPLC법은 시료 50 g + NaCl 4 g + 60% 메탄올 250 mL 고속추출 → 증류수 250 mL 희석 → Whatman No.4 여과 → 아플라톡신 면역친화칼럼(분당 2~3 mL) → 증류수 20 mL 세척 → 메탄올 1 mL 용출 + 증류수 1 mL로 총 2 mL, KOBRA CELL 또는 photochemical reactor 병용. 원문에 TLC법(전개용매 클로로포름:아세톤 90:10, UV 365 nm)과 효소면역측정법(AOAC 준용)도 병기. 정량한계 원문 미명시.
출처: 사료공정(사료표준분석방법) · 농림축산식품부 공고 제2025-312호 (시행 2025.7.10. 공고 (사료표준분석방법 2025.6판)) · 원문 보기
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