공전·공정시험법 DB › 사료공정(사료표준분석방법)
비타민 K HPLC-UV/PDA/FL
사료표준분석방법 6장. 비타민 6.10. 비타민 K / 가. 고속액체크로마토그래프에 의한 정량법
- 컬럼
- 원문 미명시 — 기기조건 표에 칼럼 규격 항목 없음. 시험 주의사항 주3)에 "순상컬럼(normal phase)"을 사용한다는 취지가 기재됨. (별도로 전처리용 정제칼럼: 60～200 메쉬 실리카 5.0 g을 유리칼럼 1.0 cm id × 30 cm에 충전하고 무수황산나트륨 2.0 g을 적층)
- 이동상
- 디클로로메탄과 이소프로판올을 이소옥탄에 녹여 각각 30%, 0.02%가 되게 한 용액 (isocratic). ※ 정제칼럼 용출용매(이동상)는 각각 15%, 0.02%로 별도 기재
- 유속
- 0.5 mL/분
- 검출
- 자외부흡광검출기(UV), 파장 254 nm
- 주입량
- 20 μL
- 컬럼온도
- 35℃
전처리: 비타민 K1으로서 3.5 μg 함유량의 시료를 500 mL 분액여두에 취해 암모니아수 4 mL로 60초 혼합 → 메탄올 60 mL 후 디클로로메탄 100 mL + 이소옥탄 50 mL 혼합액으로 추출(2회) → 75℃ 이하 감압농축, 아세톤 20 mL 세척·농축 3회 → 실리카 정제칼럼(conditioning 용액: 이소옥탄 중 0.01% 이소프로판올) 흡착 후 용출용매로 용출 → 75℃ 이하 감압농축 후 이소옥탄 5 mL 정용. 비타민 K1 표준품은 trans/cis 이성체(불활성 cis형 약 20% 이하)를 함유하므로 이성체를 분리해 전체에 대한 피크면적비를 구해 계산. 표준용액 5 μg/mL(이소옥탄). 정량한계 원문 미명시.
출처: 사료공정(사료표준분석방법) · 농림축산식품부 공고 제2025-312호 (시행 2025.7.10. 공고 (사료표준분석방법 2025.6판)) · 원문 보기
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