비타민 B2(제2법) HPLC-UV/PDA/FL

건강기능식품의 기준 및 규격 제4. 3-7 비타민 B2 / 3-7-2 비타민 B2(제2법)

컬럼: 옥타데실실릴화한 칼럼(안지름 4.6 mm, 길이 250 mm, 충전제 octadecyl silica, 충전입자크기 5 μm) 또는 이와 동등한 것
이동상: 메탄올 : 10 mM NaH2PO4 (pH 5.5) (35 : 65), 1 N 수산화나트륨용액으로 pH 조정 — 등용매
유속: 0.8 mL/분
검출: 형광검출기(FLD) 여기파장 445 nm, 측정파장 530 nm
주입량: 10 μL
컬럼온도: 40℃

제1법은 물 추출 후 광분해·과망간산칼륨 산화·클로로포름 추출 후 형광광도계로 측정하는 비크로마토법이며, 본 제2법이 HPLC-FLD법이다. 표준물질: 리보플라빈(Riboflavin, C17H20N4O6, 분자량 376.36, CAS 83-88-5), FMN(Flavin mononucleotide, 분자량 514.36 2수화물 CAS 6184-17-4 또는 478.33 무수물 CAS 130-40-5), FAD(Flavin adenine dinucleotide, 분자량 829.51 무수물, CAS 84366-81-4) — FMN·FAD는 리보플라빈으로 환산(FMN ×0.7868 또는 ×0.7317, FAD ×0.4537)하여 합산 정량한다. 전처리: 시료에 소량 증류수를 가해 분쇄(지방 많으면 탈지) 후 70~80℃ 수욕에서 12~20분 추출, 냉각 후 1 mL 중 비타민 B2가 0.05~0.5 μg이 되도록 정용. 연질캡슐은 원심분리 상등액을 취하고 잔류물에 대해 추출을 1회 반복해 합한다. 계산: 함량(mg/100 g) = C × (a×b) / S × 100/1,000. 정량한계는 원문 미명시.

출처: 건강기능식품공전 · 식약처고시 제2026-43호 (시행 2026.6.11. 시행) · 원문 보기

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