공전·공정시험법 DB › 사료공정(사료표준분석방법)
Biotin(비오틴) HPLC-UV/PDA/FL
사료표준분석방법 6장. 비타민 6.17. 비오틴 / 가. 고속액체크로마토그래피에 의한 정량
- 컬럼
- Capcellpak C18 UG120 (4.6 × 250 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것
- 이동상
- A: 0.01 M 인산이수소칼륨용액 / B: 50% 아세토니트릴. Gradient — 0.0분 A95/B5 → 3.0분 95/5 → 20.0분 10/90 → 25.0분 95/5 → 31.0분 95/5
- 유속
- 1.0 mL/min
- 검출
- 자외부흡광검출기(UVD), 파장 200 nm
- 주입량
- 10 μL
- 컬럼온도
- 40℃
적용범위: 보조사료로 사용하는 비타민제 비오틴의 정량. 전처리: 균질화 시료 1～2 g에 0.01 M 인산이수소칼륨용액 20 mL 첨가 → -4℃, 14,000 rpm 15분 원심분리 → 상등액 10 mL에 클로로포름 10 mL를 넣고 -4℃, 4,000 rpm 10분 원심분리 → 상등액 5 mL에 1 M 염산 1 mL를 넣고 60℃ 수욕에서 30분 가수분해 → 냉각 후 1 N NaOH 약 1 mL로 pH 5-7 중화 → 0.01 M 인산이수소칼륨용액으로 10 mL 정용 → 0.2 μm 시린지필터 여과. 표준물질은 USP reference standard 또는 이에 준하는 것, 표준원액 1,000 mg/L, 표준용액 0.5～30 μg/mL. 기기 분석 조건은 분석실 실정에 맞게 조정 가능. 정량한계 원문 미명시.
출처: 사료공정(사료표준분석방법) · 농림축산식품부 공고 제2025-312호 (시행 2025.7.10. 공고 (사료표준분석방법 2025.6판)) · 원문 보기
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